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《实用免疫细胞与核酸》
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
一、直接法
二、间接法
三、补体法
四、双重免疫荧光标记法
五、对照试验
第二节 荧光抗体的制备
一、荧光素
(一)异硫氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate, GITC)
(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)
(三)四甲基异硫氰酸罗达明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC)
(一)FITC标记抗体的方法
(二)四乙基罗达明标记抗体方法
(三)四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法
(四)藻红蛋白标记抗体的方法
(五)PE-标记蛋白A方法
(六)蓝色荧光素标记抗体方法
三、荧光抗体质量控制
(一)染色特异性和敏感性的测定
(二)F/P比值的测定
四、荧光抗体的保存
一、标本制作
(一)直接法
(二)间接法
(三)补体法
(四)膜抗原荧光抗体染色法
(五)双重染色法
(六)荧光抗体再染色法
三、荧光抗原染色法
一、荧光显微镜
(一)光源
(二)滤色系统
(三)反光镜
(四)聚光镜
(五)物镜
(六)目镜
(七)落射光装置
二、荧光显微镜标本制作要求
三、使用荧光显微镜的注意事项
四、荧光图像的记录方法
一、非特异性染色的主要因素
二、消除非特异性染色的方法
(一)动物脏器粉末吸收法
(二)透析法
(三)葡聚糖凝胶G-50柱层析法
(四)DEAE纤维素柱层析法
(五)荧光抗体稀释法
(六)纯化抗原法
A-
A+
(六)纯化抗原法
用各种方法提纯单一成分的抗原是产生单价特异性抗体的最主要条件。近代免疫化学技术(免疫吸收法)和柱层析法等提供了很大的可能性,可参考有关专着。
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