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《实用免疫细胞与核酸》
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
一、直接法
二、间接法
三、补体法
四、双重免疫荧光标记法
五、对照试验
第二节 荧光抗体的制备
一、荧光素
(一)异硫氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate, GITC)
(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)
(三)四甲基异硫氰酸罗达明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC)
(一)FITC标记抗体的方法
(二)四乙基罗达明标记抗体方法
(三)四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法
(四)藻红蛋白标记抗体的方法
(五)PE-标记蛋白A方法
(六)蓝色荧光素标记抗体方法
三、荧光抗体质量控制
(一)染色特异性和敏感性的测定
(二)F/P比值的测定
四、荧光抗体的保存
A-
A+
四、荧光抗体的保存
以0~4℃或-20℃低温保存,防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的叠氮钠防腐,小量分装如0.1~1ml,真空干燥后更易长期保存。
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(二)F/P比值的测定
一、标本制作
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