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《实用免疫细胞与核酸》
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第一节 免疫荧光细胞化学的原理
一、直接法
二、间接法
三、补体法
四、双重免疫荧光标记法
五、对照试验
第二节 荧光抗体的制备
一、荧光素
(一)异硫氰酸荧光素(Fluoresceinisothiocyanate, GITC)
(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)
(三)四甲基异硫氰酸罗达明(tetramethylrhodamineisothiocyanate, TMRITC)
(一)FITC标记抗体的方法
(二)四乙基罗达明标记抗体方法
(三)四甲基异硫氰酸罗达明标记抗体方法
(四)藻红蛋白标记抗体的方法
(五)PE-标记蛋白A方法
(六)蓝色荧光素标记抗体方法
三、荧光抗体质量控制
(一)染色特异性和敏感性的测定
(二)F/P比值的测定
四、荧光抗体的保存
一、标本制作
(一)直接法
(二)间接法
(三)补体法
(四)膜抗原荧光抗体染色法
A-
A+
(四)膜抗原荧光抗体染色法
本法应用直接法或间接法的原理和步骤,可对活细胞在试管内进行染色,常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究,阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。
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(五)双重染色法
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